GST-Smad4融合蛋白的表达与纯化

• 作者: 徐志卿 杨予涛 梅竹
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Smad4 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 134-138
• 语种: 中文

摘要

旨在原核表达Smad4基因,纯化获得GST-Smad4融合蛋白.以人表皮HaCaT细胞的cDNA为模板,利用PCR扩增含有BamH I和Sal酶切位点的Smad4基因；然后将其克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中,将正确的重组载体转入大肠杆菌BL21(DE3)；用IPTG诱导表达,再利用MagneGST particles亲和纯化GST-Smad4融合蛋白；最后通过Western blot鉴定此融合蛋白.结果显示,成功构建pGEX-4T-1-Smad4原核表达载体；30℃条件下,0.2 mmol/L的IPTG能诱导出大量的可溶性GST-Smad4蛋白；经MagneGST particles纯化的GST-Smad4蛋白可被Smad4的抗体特异识别.纯化的GST-Smad4蛋白可用于后续的生物学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志卿	首都医科大学基础医学院	29	45	4.0	6.0
2	杨予涛	首都医科大学基础医学院	17	12	2.0	3.0
3	梅竹	首都医科大学基础医学院	2	1	1.0	1.0