苹果SRAP-PCR反应体系的建立

• 作者: 司鹏 张玉刚 戴洪义 曹尚银 薛华柏 郭俊英
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苹果 SRAP-PCR 正交分析
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 168-173
• 页数: 6页
• 分类号: S661.1
• 语种: 中文

摘要

以苹果(Malus domestica Borkh.)品种Telamon及Telamon×Fuji的F1代为试材,采用改良的CTAB法提取苹果叶片的DNA,利用正交设计L16(45)和直观分析以及方差分析相结合,探讨了Mg~(2+)、dNTPs、Primer、Taq聚合酶、模板DNA用量对苹果SRAP-PCR反应的影响.建立了总体积为10 μL的苹果SRAP-PCR反应体系, Mg~(2+)浓度为2.0 mol·L~(-1),dNTPs浓度为0.8 mmol·L~(-1),Primer浓度为0.2 mol·L~(-1),Taq DNA聚合酶含量为0.6 U,DNA含量为60 ng,并含1 μL 10×buffer (Mg~(2+) free).应用该反应体系,用不同的引物组合对48份苹果样品DNA进行SRAP-PCR扩增,结果显示反应体系具有较高的稳定性.