MMP9-PEX的原核表达、纯化与复性研究

• 作者: 唐红卫 张伟静 张绍峰 李锦毅
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 血红素蛋白样结构域 原核表达 纯化 复性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 504-507,512
• 分类号: Q71
• 字数: 4084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.06.007

摘要

目的 对人基质蛋白酶9(matrix metalloproteinase,MMP9)C端血红素结合蛋白样结构域(hemopexin domain,PEX)的原核表达条件、透析复性条件进行优化,以获得高表达的活性蛋白.方法 将构建好的原核表达载体PET-his-MMP9-PEX转化至大肠埃希菌菌株BL21(DE-3),异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后产生包涵体蛋白,探讨不同IPTG浓度、不同诱导时间、不同菌液密度值对目的 蛋白表达产量的影响;盐酸胍裂解包涵体,采用NI-NTA进行纯化,对纯化蛋白的透析复性条件进行优化;采用明胶酶谱的方法检测MMP9-PEX的活性.结果 经纯化透析复性后蛋白的纯度在95%以上,复性回收率为36.86%.结论 本研究优化了MMP9-PEX的原核表达、透析复性条件,获得了有活性的MMP9-PEX蛋白,为进一步研究MMP9-PEX的功能提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐红卫		21	88	5.0	8.0
2	李锦毅		14	70	4.0	8.0
3	张绍峰		4	30	1.0	4.0
4	张伟静		1	1	1.0	1.0