表达HBsAg特异性siRNA的重组腺相关病毒载体的构建

• 作者: 余源 刘嘉 刘慎沛 杨东亮 杨燕 胡斌 马智勇 黄红平
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HepG2.215细胞 腺相关病毒2 RNA干扰 HBsAg
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-165
• 分类号: R5
• 字数: 3182字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2010.03.001

摘要

目的 构建表达针对HBsAg小发卡RNA(shRNA)的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用.方法 将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得重组表达质粒(pAAV-shHBs-hrGFP);采用磷酸钙转染法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染AAV 293细胞,进行rAAV-shHBs-hrGFP重组病毒包装.收获病毒感染HepG2.215细胞;采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平.结果 酶切鉴定、测序结果表明,pAAV-shHBs-hrGFP载体成功构建.包装收获的rAAV-shHBs-hrGFP病毒液可以感染HepG2.215细胞,并且可以抑制HBsAg和HBeAg的表达.结论 制备的rAAV-shHBs-hrGFP病毒载体能够抑制HBV在体外的抗原表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡斌	华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室	152	1611	22.0	31.0
2	杨东亮	华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室	127	582	14.0	17.0
3	刘嘉	华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室	12	44	4.0	6.0
4	杨燕		1	6	1.0	1.0
5	马智勇	华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室	2	6	1.0	2.0
6	黄红平		1	6	1.0	1.0
7	余源		1	6	1.0	1.0
8	刘慎沛		1	6	1.0	1.0