黄牛朊蛋白原核表达产物的复性与活性分析

• 作者: 刘湘涛 吴润 呼志斌 赵春林 陈建华
• 来源期刊: 兰州大学学报（医学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 牛朊蛋白 原核表达 复性 活性分析
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 16-20
• 分类号: S852.659
• 字数: 4047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2812.2010.04.004

摘要

目的 复性黄牛朊蛋白原核表达产物,分析复性蛋白的活性,以获得有活性的牛重组朊蛋白.方法 构建并诱导表达黄牛朊蛋白基因重组菌,复性其包涵体裂解物,对GST-BoPrP(93～241)(Q234R)复性产物进行GSTrap FF柱层析纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹观察其提纯和复性效果.结果 重组菌可表达分子质量约为42.4 ku的目的 蛋白,包涵体裂解物经过透析复性后,可获得较高纯度的复性目的 蛋白.各复性产物和纯化的GST-BoPrP(93～241)(Q234R)蛋白经免疫印迹鉴定,发现仅分子质量约为42.4 ku的条带与单抗4C11结合.结论 获得高纯度复性黄牛朊蛋白原核表达蛋白,具有良好的免疫反应活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘湘涛	中国农业科学院兰州兽医研究所	86	606	14.0	22.0
2	吴润	甘肃农业大学动物医学院	108	576	13.0	19.0
3	赵春林	甘肃农业大学动物医学院	7	15	2.0	3.0
4	呼志斌	兰州大学第二医院检验科	5	10	2.0	3.0
5	陈建华		10	25	3.0	5.0