基于T7RNA聚合酶/启动子的细胞融合报导系统载体的构建

• 作者: 刘利东 朱蔚云 李冰 黄金水
• 来源期刊: 广州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞融合 T7RNA聚合酶 T7启动子 荧光素酶 报告系统
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 20-23
• 分类号: Q813
• 字数: 2550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1836.2010.02.005

摘要

目的:建立T7RNA聚合酶/T7启动子载体系统,作为观察细胞融合是否成功的报导系统.方法:设计并合成引物从BL21细菌中扩增T7 RNA聚合酶序列,并将其克隆进入真核表达载体pRc/CMV2中,作为RNA聚合酶的供体.T7RNA聚合酶特异性识别的T7启动子人工合成,构建于荧光素酶的表达载体pGL3中,利用其荧光素酶基因作为报导基因.两质粒共转染A549细胞和Vero E6细胞,检测荧光素酶的表达.结果:共转染pRc/CMV2-T7RNAP和pGL3-T7的A549细胞和Vero E6细胞的荧光强度分别为57 745±7 747和43 679±8 616,转染质粒pGL3-T7的细胞空白对照荧光强度1 034±201和1 091±157,分别与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:成功构建了T7RNA聚合酶/T7启动子载体的细胞融合报导系统,可应用于细胞融合的相关实验研究中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李冰	广州医学院医学实验中心	139	847	15.0	20.0
2	刘利东	广州医学院第一附属医院检验科	37	198	9.0	12.0
3	朱蔚云	广州医学院遗传学教研室	8	80	4.0	8.0
4	黄金水	中山大学附属第二医院输血科	9	34	3.0	5.0