人内皮高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备

• 作者: 刘月明 刘海荣 刘漪沦 张玮 蔡震 马兵
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内毒素类 内皮细胞 内皮高表达脂多糖相关因子1 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 452-455
• 分类号: R6
• 字数: 4744字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2010.06.016

摘要

目的 制备人内皮高表达脂多糖相关因子 1(EOLA1)多克隆抗体,检测EOLA1在人脐静脉内皮细胞(HUVEG)中的表达.方法 复性成功表达EOLA1的蛋白样品(样品1和2),二辛丁酸法检测2种蛋白样品浓度,应用肽质量指纹图谱(PMF)分析法对2种样品进行验证.采用与理论肽段符合率高的EOLA1蛋白样品免疫4只小鼠,同时取4只未免疫小鼠作对照.采集各小鼠血液分离血清,应用饱和硫酸铵盐析沉淀法纯化EOLA1多克隆抗体,ELISA法分析效价(数据以吸光度值表示).蛋白质印迹法检测EOLA1在HUVEC中的表达.结果 蛋白样品1和2的浓度分别为0.124 16、0.132 15 mg/mL.PMF分析显示,样品1的理论肽段符合率为32%,样品2的理论肽段符合率为24%.选用蛋白样品1免疫小鼠,经检测抗体效价在1∶10 000以上;应用制备的EOLA1多克隆抗体可以检测到EOLA1蛋白在HUVEC中表达.结论 应用EOLA1原核表达蛋白免疫小鼠可以制备EOLA1多克隆抗体,并可用于检测EOLA1蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘漪沦	成都医学院第一附属医院烧伤整形科	42	119	6.0	7.0
2	刘月明	成都医学院第一附属医院烧伤整形科	30	83	5.0	7.0
3	刘海荣	成都医学院第一附属医院烧伤整形科	16	27	4.0	5.0
4	蔡震	四川省人民医院整形美容外科	4	12	2.0	3.0
5	马兵	成都医学院第一附属医院烧伤整形科	18	64	4.0	7.0
6	张玮	成都医学院第一附属医院烧伤整形科	7	7	2.0	2.0