唾液链球菌尿素酶基因的克隆和表达

• 作者: 冯希平 栾晓玲 王艳 谢幼华 陶丹英
• 来源期刊: 中华口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 链球菌,口腔 尿素酶 镍 龋齿
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 498-501
• 分类号: R78
• 字数: 3578字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2010.08.014

摘要

目的 克隆唾液链球菌57.Ⅰ的尿素酶基因,并在不添加外源性镍离子的情况下表达出有活性的尿素酶,以期为进一步研究口腔细菌的尿素分解机制和牙菌斑生物膜的产碱活性提供依据.方法 将尿素酶基因分成前、中、后三段,分别设计引物,应用聚合酶链反应(PCR)法进行克隆并测序鉴定;进而采用双酶切的方法 将分段克隆的产物逐步连接为完整的尿素酶基因;将含有完整尿素酶基因的质粒转化感受态大肠杆菌TG-1,经酚红脲酶试验检测其尿素分解活性.结果 所克隆的唾液链球菌57.Ⅰ尿素酶基因序列正确;无需添加氯化镍,该克隆能够在大肠杆菌中表达出有活性的尿素酶,分解培养基中的尿素产生氨,升高环境中的pH值.结论 本研究克隆的唾液链球菌尿素酶基因无需添加外源性镍离子就能够表达出尿素分解活性,可用于今后替代疗法防龋研究中构建更适合临床应用的产碱效应菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯希平	上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔预防儿童科	8	39	4.0	6.0
2	王艳	上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔预防儿童科	2	6	2.0	2.0
3	谢幼华	复旦大学医学分子病毒学教育部卫生部重点实验室	3	7	2.0	2.0
4	陶丹英	上海市口腔医学研究所上海市口腔医学重点实验室上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔预防儿童科	1	4	1.0	1.0