人RIP2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定

• 作者: 孙丽萍 曾琪 胡巢凤 蒋宇
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 受体相互作用蛋白2启动子(RIP2启动子) 载体 绿色荧光蛋白 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 140-144
• 分类号: R730.23
• 字数: 4125字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2010.02.008

摘要

目的:构建人RIP2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体.方法:根据特定限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含人RIP2基因启动子不同长度2段序列,构建含人RIP2基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-RIP2(750 bp)wt、pEGFP-C2-RIP2(941 bp)wt,用Vsp I和Nhe I双酶切鉴定重组质粒,进行DNA序列分析,重组质粒经阳离子聚合物JetPeiTM介导转染HEK293细胞48 h后观察.结果:酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,重组质粒转染HEK293细胞均能表达绿色荧光.其中构建的pEGFP-C2-RIP2(750 bp)wt重组质粒绿色荧光表达强于pEGFP-C2-RIP2(941 bp)wt.结论:成功构建2段不同长度的人RIP2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡巢凤	暨南大学医学院病理生理学教研室	46	252	10.0	13.0
2	蒋宇	暨南大学医学院病理生理学教研室	9	32	4.0	5.0
3	曾琪	暨南大学医学院病理生理学教研室	3	4	1.0	2.0
4	孙丽萍	暨南大学医学院病理生理学教研室	12	73	4.0	8.0