幽门螺杆菌外膜蛋白cagL基因的克隆、表达及其对IL-8 mRNA表达的影响

• 作者: 田树伟 邵世和 韩军 黄世腾 黄河
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 原核表达 白细胞介素-8
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 194-198
• 分类号: R378.99
• 字数: 4462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2010.03.003

摘要

目的:克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)NCTC11637菌株cagL基因,并探讨其对IL-8 mRNA表达的影响.方法:设计cagL引物,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后测序分析, 用信息学软件分析其物理化学特性,并构建表达载体cagL-PET28a(+)转化E.coli BL-21(DE3),IPTG诱导表达, 镍亲和层析纯化,SDS- PAGE及蛋白质印迹鉴定表达蛋白.纯化蛋白与细胞GES-1共培养,提取细胞总RNA,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达.结果:测序分析表明cagL编码成熟肽的碱基序列为654 bp,编码217个氨基酸,与基因库公布的其他H.pylori菌株的基因序列同源性为96%～98%,氨基酸同源性为 97%～99%,软件预测显示有多个明显的具有抗原活性的结构域;表达蛋白的相对分子质量约为32 000,蛋白质印迹检测融合蛋白具有良好的抗原活性;重组蛋白作用于GES-1细胞后,可诱导细胞因子 IL-8 在 mRNA 水平上的表达.结论:CagL蛋白可刺激GES-1细胞IL-8 mRNA的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	99	382	9.0	14.0
2	黄河	江苏大学生命科学研究院	13	31	3.0	5.0
3	田树伟	江苏大学生命科学研究院	6	9	2.0	2.0
4	韩军	江苏大学生命科学研究院	6	9	2.0	2.0
5	黄世腾	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	5	9	2.0	2.0