干扰素α2b基因真核表达质粒的构建及表达

• 作者: 朱一松 王妍 陈奋则 高仁均
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 干扰素α2b 真核细胞 基因表达 CHO细胞
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1210-1213
• 分类号: Q511|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 构建干扰素α2b(IFNα2b)基因真核表达质粒,并在CHO-dhfr细胞中表达.方法 从DH5α-pbv220-IFNα2b工程菌中扩增IFNα2b基因片段,克隆入psv-dhfr质粒中,构建重组真核表达质粒psv2-dhfr-IFNα2b,转染至CHO-dhfr细胞中,经MTX加压筛选,获得稳定生长的单克隆细胞株.采用Wish细胞病变抑制法检测转染细胞中IFNα2b的抗病毒活性;提取细胞基因组DNA,进行PCR鉴定.结果 重组真核表达质粒psv2-dhfr-IFNα2b经PCR及双酶切鉴定证明构建正确;转染后的重组细胞表达的IFNα2b具有抗病毒活性,且活性较强;以转染细胞基因组DNA为模板,可扩增出IFNα2b基因条带.结论 已成功构建IFNα2b基因真核表达质粒,并在CHO-dhfr细胞中表达了具有生物学活性的IFNα2b蛋白,为进一步对IFNα2b进行真核表达的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王妍		32	64	4.0	6.0
2	陈奋则		1	4	1.0	1.0
3	朱一松	吉林大学分子酶学实验室	1	4	1.0	1.0
4	高仁均	吉林大学分子酶学实验室	1	4	1.0	1.0