弓形虫RH株微线体蛋白MIC3基因的克隆与表达

• 作者: 傅玉才 张仁利 李军建 耿艺介 胡忠 黄达娜
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 MIC3 PCR 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1153-1155,1172
• 分类号: R382.5
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆和表达弓形虫微线体蛋白MIC3基因.方法 从弓形虫RH株分离总的RNA,反转成cDNA.根据MIC3基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫cDNA中扩增MIC3基因片段,插人pGEM-T载体,并转化大肠杆菌Top10,经PCR、双酶切、测序验证后,将MIC3基因片段定向亚克隆到载体pET-28a中构建原核表达重组质粒pET-28a-MIC3,重组子在E.coli BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western.blot分析.结果 从弓形虫RH株cDNA中扩增出792bp大小的MIC3基因片段并诱导表达27 300 Mr的重组MIC3蛋白.结论 成功构建和表达了弓形虫pET-28a-MIC3重组质粒,为弓形虫病诊断抗原和疫苗的研究莫定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利		192	798	13.0	17.0
2	耿艺介		105	506	11.0	15.0
3	傅玉才	汕头大学医学院寄生虫教研室	115	556	12.0	18.0
4	胡忠	汕头大学医学院寄生虫教研室	53	630	15.0	23.0
5	黄达娜		134	499	10.0	13.0
6	李军建	汕头大学医学院寄生虫教研室	1	1	1.0	1.0