Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达

• 作者: 刘大伟 尹秀凤 廖俊伟 张小飞 毛火云 胡来根
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Ⅰ型鸭肝炎病毒 VP1基因 重组杆状病毒 昆虫细胞 表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 364-368
• 分类号: Q78
• 字数: 3849字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.02.025

摘要

根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)基因组序列设计并合成一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ(A66株)VP1基因.用限制性内切酶EcoR Ⅰ/Hind Ⅲ消化VP1基因和转移载体pFastbac Ⅰ,在T4 DNA连接酶作用下将二者连接构建转移质粒pFastbac-VP1.经PCR、双酶切及测序鉴定后将其转化至含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10bac中,蓝白斑筛选获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP1,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf 9,获得重组杆状病毒rvBac-VP1.SDS-PAGE分析结果表明,VP1基因在昆虫细胞中获得表达,表达产物分子量约为2.7×104.Western-blot检测结果表明,表达产物能与抗DHV-Ⅰ阳性血清发生反应,具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡来根		12	85	5.0	9.0
2	尹秀凤		30	141	7.0	10.0
3	毛火云		7	29	3.0	5.0
7	刘大伟		2	12	2.0	2.0