融合基因Mdc-hly的构建及原核表达

• 作者: 卢雪梅 朱家勇 李小波 梅寒芳 王艳 褚夫江 金小宝 马艳
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 家蝇天蚕素 人溶菌酶 Gene-SOEing 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 150-155
• 页数: 6页
• 分类号: Q3
• 字数: 4959字
• 语种: 中文

摘要

构建家蝇天蚕素-人溶菌酶(Mdc-hly)融合基因,实现Mdc-hly基因在大肠杆菌中的表达.通过RT-PCR分别扩增出家蝇天蚕素和人溶菌酶的成熟肽基因序列,再利用Gene-SOEing 技术构建融合基因,将融合基因克隆至pET32a表达载体,转化E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导得到高效表达,融合蛋白分子量约为38 kD.Western blotting杂交证实了表达蛋白的抗原活性.成功构建了融合其因并进行了原核表达,为进一步的生物活性研究打下基础.