人类肥胖相关新基因LYRM1原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 周晓玉 张敏 曹兴国 王玢 程锐 邱洁 郭锡熔
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肥胖 LYRM1基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 营养性疾病
• 页码范围: 479-481
• 分类号: R723.1
• 字数: 3568字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人类肥胖相关新基因LYRM1原核表达载体,并获取LYRM1重组蛋白.方法 采用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中扩增出LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代板乳糖苷(IPTG)诱导LYRM1融合蛋白的表达,利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫蛋白印迹(Western blot)鉴定其表达.结果 PCR、酶切鉴定及测序结果表明重组质粒构建正确.LYRM1基因在原核细胞中成功表达,经SDS-PAGE鉴定融合蛋白相对分子质量约为40 000,主要以不可溶的包涵体形式存在于菌体沉淀中,Western blot分析表明融合蛋白具有免疫原性.结论 成功扩增和克隆了人类肥胖相关新基因LYRM1,并通过构建其原核表达载体,使其在大肠杆菌中高效表达,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程锐	南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科	62	436	11.0	19.0
2	周晓玉	南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科	100	606	14.0	20.0
3	邱洁	南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科	24	74	4.0	7.0