重组嵌合受体anti-erbB2 scFv-CD28-ξ全基因合成及其真核表达载体的构建

• 作者: 刘天懿 刘辉 李瑾昱 杨波 焦顺昌
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 嵌合受体 基因表达 转染
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 360-362
• 页数: 3页
• 分类号: R34
• 字数: 2025字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过合成嵌合受体anti-erbB2 scFv-CD28-ξ的基因并建立其真核表达载体,为进一步研究增强NK细胞抗瘤活性创造条件.方法 在DNA2.0和Gene20liga软件辅助下对目的基因密码子及RNA二级结构进行优化并在序列的两端分别引入HindⅢ和EcoRI限制酶切位点,根据基因序列分析的结果化学合成长度为50～70bp的单链oligo,利用PCR将合成的oligo拼接成完整的序列,将合成好的序列装入PMD-18T载体并转染至感受态细胞DH5α,测序验证重组克隆中基因序列.完整的序列经Hind m和EcoRI酶切后连接至目的载体PCDNA3.1(+)中,并转染COS-7细胞.结果 合成DNA片段长度为1 803bp,经测序验证与目的基因嵌合受体anti-erbB2 scFv-CD28-ξ大小、序列一致.结论 构建其真核表达载体PCDNA3.1(+)后转染COS-7细胞,实现了anti-erbB2 scFv-CD28-ξ基因在COS-7细胞中的体外转染及瞬时表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦顺昌	解放军总医院肿瘤科	163	945	14.0	22.0
2	杨波	解放军总医院肿瘤科	117	631	13.0	18.0
3	刘辉	解放军总医院肿瘤科	58	420	11.0	18.0
4	李瑾昱	解放军总医院肿瘤科	9	24	4.0	4.0
5	刘天懿	解放军总医院肿瘤科	4	7	2.0	2.0