葡萄球菌A型肠毒素检测竞争ELISA方法的建立

• 作者: 刘莹 周凤娟 孙跃辉 徐丹丹 黄金海
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡萄球菌A型肠毒素(SEA) 重组蛋白 间接竞争酶联免疫吸附反应(ciELISA)
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 380-382,385
• 分类号: Q814.9
• 语种: 中文

摘要

为建立快速、灵敏、特异的检测食品中金黄色葡萄球菌A型肠毒素的方法,应用构建的pGEX-6P-SEA、pET28α-SEA重组质粒表达带有不同融合肽的葡萄球菌A型肠毒素,分别通过谷胱甘肽亲和纯化、镍螯合纯化获得SEA的重组融合表达蛋白HIS-SEA、GST-SEA,以HIS-SEA为包被抗原,以GST-SEA、天然SEA肠毒素为竞争抗原,确立了SEA型肠毒素ELISA检测的工作条件:包被浓度为2.5μg/mL,阳性血清稀释度为1:50,辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡免疫球蛋白工作浓度为1:2000.建立了以重组肠毒素GST-SEA作为竞争抗原检测葡萄球菌肠毒素SEA的间接竞争ELISA(ciELISA)方法,竞争肠毒素GST-SEA蛋白浓度x与P/N值y的关系式:x(GST-SEA)=1.99-y/0.34,R2(GST-SEA)=0.9964,线性检测范围均为1～62.5ng/mL,最低检测量为1ng/mL,此方法丰富了食品中A型肠毒素的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周凤娟	天津大学农业与生物工程学院	13	122	7.0	10.0
2	黄金海	天津大学农业与生物工程学院	31	164	7.0	12.0
3	孙跃辉	天津大学农业与生物工程学院	11	85	4.0	9.0
4	刘莹	天津大学农业与生物工程学院	19	133	6.0	11.0
5	徐丹丹	天津大学农业与生物工程学院	3	11	2.0	3.0