溶血素的定点突变及与表面蛋白A的表达

• 作者: 曾建明 李有强 林冬玲 薛新娜 鄂顺梅 陈茶
• 来源期刊: 中华医院感染学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌表面蛋白A 肺炎链球菌溶血素 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（18）
• 页码范围: 2755-2758
• 分类号: R378
• 语种: 中文

摘要

目的 利用基因定点突变技术扩增Ply突变基因△Ply,基因重组技术构建△Ply与PspA基因的串联融合表达蛋白PspA-△Ply.方法 根据肺炎链球菌TIGR4型表面蛋白A和溶血素基因序列设计引物,定点突变法扩增Ply突变基因,PCR法扩增PspA基因.运用基因重组技术构建pET32a-PspA-△Ply表达载体,双酶切与测序验证重组质粒;重组质粒转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经不同时间、不同温度、不同浓度IPTG诱导表达融合蛋白,Western免疫印迹鉴定表达产物.结果 Ply突变基因测序证实ply基因的△A146R147碱基成功突变,双酶切与测序证实pET32a-PspA-△Ply构建正确,Western免疫印迹见重组质粒转化菌在120×103现特异性条带.结论 成功实现Ply基因的定点突变,构建PspA-△Ply融合蛋白表达载体,为研究新型抗肺炎链球菌蛋白疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈茶	广东省中医院大学城医院检验科	121	643	11.0	19.0
2	曾建明	广东省中医院大学城医院检验科	30	94	5.0	8.0
3	林冬玲	广东省中医院大学城医院检验科	16	83	5.0	8.0
4	李有强	广东省中医院大学城医院检验科	23	71	5.0	7.0
5	鄂顺梅	广东省中医院大学城医院检验科	14	40	3.0	5.0
6	薛新娜	广东省中医院大学城医院检验科	4	13	2.0	3.0