代谢工程改造野生耐酸酵母生产L-乳酸

• 作者: 丁重阳 张勤 张梁 王正祥 石贵阳
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 耐酸酵母 米根霉 乳酸脱氢酶 代谢工程 L-乳酸
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 代谢工程与合成生物学
• 页码范围: 1024-1031
• 分类号: Q959.468
• 语种: 中文

摘要

以选育低pH条件下高产L-乳酸的酵母菌为目的,从自然样品中筛选分离得到一株能在pH 2.5(乳酸调节)的培养基中生长且不利用乳酸的酵母(初步鉴定为木兰假丝酵母Candidamagnolia)；进一步将来源于米根霉As3.819的乳酸脱氢酶编码基因(ldhA)插入含有G418抗性基因的酵母穿梭载体,构建了重组质粒pYX212-kanMX-ldhA,电转化入野生型C.magnolia中,筛选获得了一株具有产L-乳酸能力的重组菌株C.magnolia-2；通过发酵实验表明,该重组菌产L-乳酸的最适pH为3.5,并在pH 2.5时正常发酵产乳酸.本研究成果为首次从自然界筛选到一株耐高浓乳酸的耐酸酵母菌,并以此为宿主菌构建了具有生产L-乳酸能力的耐酸重组酵母,为以耐酸酵母菌高产L-乳酸进行了有益的探索.