代谢工程改造Corynebacterium glutamicum生产L-苹果酸

• 作者: 仪宏 冯惠勇 刘金雷 李天明 王崇慧 赵一
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum) L-苹果酸 基因敲除 基因敲入
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 13-19
• 页数: 7页
• 字数: 3396字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201612003

摘要

以提高L-苹果酸的产量为目标,采用一次交换两次同源重组的方法,利用反向筛选标记,在敲除了丙酮酸醌氧化还原酶编码基因(pqo),丙酮酸脱氢酶编码基因(pdh)和乳酸脱氢酶编码基因(lldh)的C.glutamicum△pqo△pdh△lldh(C.glutamicum△PPL)基础上,无痕敲除了L-苹果酸积累支流代谢途径的2个关键酶基因:苹果酸醌氧化还原酶编码基因(mqo)和苹果酸酶编码基因(male),同时敲入了苹果酸分泌转运蛋白基因(transb),获得了产L-苹果酸的工程菌株;采用高效液相色谱法检测了工程菌株C.glutamicumAPPLAmqo::transbAmale的发酵产物.实验结果表明:C.glutamicum ATCC 13032发酵后不积累L-苹果酸,而工程菌C.glutamicum△PPL△mqo::transb △male发酵48h,积累了12.8 g/L的L-苹果酸,工程菌的糖酸转化率为33.18％,为利用C.glutamicum ATCC 13032发酵生产L-苹果酸提供了基础遗传资源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯惠勇	河北科技大学生物科学与工程学院	26	260	10.0	15.0
2	仪宏	河北科技大学生物科学与工程学院	39	552	13.0	22.0
3	刘金雷	河北科技大学生物科学与工程学院	12	20	2.0	3.0
4	李天明	河北科技大学生物科学与工程学院	16	25	3.0	4.0
5	赵一	河北科技大学生物科学与工程学院	3	4	1.0	2.0
6	王崇慧	河北科技大学生物科学与工程学院	3	4	1.0	2.0