分子信标实时荧光定量PCR构绵羊PrP基因质粒和标准曲线

• 作者: 刁小龙 吴润 李发弟 王川 王芳 赵春林
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: PrP RT-PCR 实时荧光定量PCR 标准曲线 质粒 绵羊
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 708-711
• 分类号: R373
• 字数: 3566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.08.008

摘要

目的:为能够用实时荧光定量PCR研究消化系统PrP mRNA的表达水平,构建目的基因PrP的标准品质粒和标准曲线.方法:根据GenBank中绵羊基因编码区保守序列,设计特异性引物和分子信标探针;提取总RNA,经反转录、RT-PCR后,提取质粒,PCR-SSCP及测序鉴定,获得ARQ质粒；将质粒梯度稀释,进行荧光定量PCR,获得标准曲线及回归方程.结果:结果显示,本实验设计的分子信标具有特异性强、灵敏度高和结果准确的特性；标准曲线相关系数r2=0.999,表明线性关系好,成功构建了目的基因的标准品质粒和标准曲线.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李发弟	甘肃农业大学动物科学技术学院	178	1869	22.0	32.0
2	吴润	甘肃农业大学动物医学学院	108	576	13.0	19.0
3	赵春林	甘肃农业大学动物医学学院	7	15	2.0	3.0
4	刁小龙	甘肃农业大学动物医学学院	6	36	3.0	6.0
5	王芳		16	75	6.0	8.0
6	王川	甘肃农业大学动物医学学院	17	45	3.0	6.0