受强力霉素调控的真核表达系统RAW264.7Tet-lon细胞株的建立

• 作者: 彭晓慧 毛萱 汤顺清
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 强力霉素 转染 诱导表达调控 RAW264.7细胞株
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 383-386
• 分类号: R978.I+4
• 字数: 2861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2011.04.006

摘要

目的:利用Tet-lon诱导表达调控系统构建可以用强力霉素调控表达的RAW264.7 Tet-lon细胞株,探讨目的基因NF-kB的作用.方法:将调控质粒pCDNA6/TR转染RAW264.7细胞,经潮霉素筛选得到稳定单克隆.单克隆扩大培养后,转染pCDNA4/TO/lacZ质粒,再经过强力霉素诱导表达,检测β-半乳糖苷酶(β-gal)活性,筛选出受强力霉素调控的高诱导水平、低背景表达的RAW264.7 Tet-on细胞株.结果:成功建立一株受强力霉素调控的高诱导水平、低背景表达的细胞株RAW264.7 Tet-on 3,并且强力霉素对下游基因β-gal的诱导效果具有浓度和时间依赖性,强力霉素的最佳诱导时间为24h,强力霉素的最佳诱导质量浓度为1μg/mL.结论:已获得受强力霉素调控的细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛萱	暨南大学生命科学技术学院生物医学工程系	30	269	10.0	15.0
2	汤顺清	暨南大学生命科学技术学院生物医学工程系	55	461	12.0	19.0
3	彭晓慧	暨南大学生命科学技术学院生物医学工程系	5	5	1.0	2.0