经基因工程改造的花生主要过敏原Arah2制备及其低致敏原性鉴定

• 作者: 刘志刚 刘芳 夏立新 易海涛 曹小勇 汤慕瑾 贾梦阳
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因工程 花生 过敏原 Ara h 2 低致敏
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 993-998
• 分类号: Q786
• 字数: 3790字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2286.2011.05.030

摘要

构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其过敏原性.将花生主要过敏原Arah2基因序列进行颠换,并将颠换后的序列进行合成,再将合成后的基因克隆到原核表达载体pET -32a(+)上,然后转入Origami宿主表达菌中；利用Isopropyl β-D -1 - Thiogalactopyranoside (IPTG)诱导表达；通过Ni2+亲和层析纯化目的蛋白；Western blotting和ELISA鉴定该重组蛋白的过敏原性.测序结果表明合成后的序列成功整合到原核表达载体pET-32a(+)上.重组的目的蛋白纯化后经SDS- PAGE鉴定,蛋白大小与理论值相符.Western blotting和ELISA结果均表明经基因工程改造的Ara h2(F- Ara h 2)蛋白与重组的Ara h 2(R-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏患者混合血清中IgE显著降低.成功构建经基因工程改造的Ara h 2表达载体,初步的体外实验表明该基因表达的重组蛋白具有低致敏原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏立新	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	24	130	8.0	10.0
5	易海涛	深圳大学生命科学学院	4	20	3.0	4.0
9	贾梦阳	深圳大学医学院	3	10	1.0	3.0
10	刘芳		1	8	1.0	1.0
11	汤慕瑾		1	8	1.0	1.0
12	曹小勇		1	8	1.0	1.0