Exendin -4在大肠杆菌中的串联表达、纯化及活性鉴定

• 作者: 刘延杰 季虹 宋长征 林鲁霞 荣海钦
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: Exendin -4:串联表达 纯化 胰岛素释放试验 2型糖尿病
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 40-44
• 分类号: Q786
• 字数: 4548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.05.122

摘要

目的:完成钝尾毒蜥Exendin -4基因在大肠杆菌中的串联高效表达.方法:按照大肠杆菌偏爱密码子设计Exendin -4基因片段,利用同尾酶构建多拷贝串联的表达载体,于大肠杆菌BL21( DE3)中诱导表达,SDS - PAGE鉴定结果,表达产物Ni柱纯化后肠激酶切割,高效液相色谱及四级杆-飞行时间质谱纯化、鉴定,确定目标产物,作用胰岛瘤细胞INS -1检测胰岛素释放活性.结果:成功构建重组载体pET28a -(Exendin -4)n(n=2,4,6),且均获得可溶性表达产物,重组表达蛋白经切割、纯化、鉴定和制备,最终得到纯度98%的Exendin -4,其具有与标准品相似的促葡萄糖刺激的胰岛素释放活性.结论:试验成功利用串联表达方式制备有活性的Exendin -4,为下一步2型糖尿病治疗药物的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	荣海钦	山东省内分泌与代谢病研究所山东省医学科学院	73	462	11.0	17.0
2	季虹	山东省内分泌与代谢病研究所山东省医学科学院	41	270	8.0	14.0
3	刘延杰	山东省内分泌与代谢病研究所山东省医学科学院	3	6	1.0	2.0
4	林鲁霞	山东省内分泌与代谢病研究所山东省医学科学院	3	11	2.0	3.0
5	宋长征	山东省内分泌与代谢病研究所山东省医学科学院	2	5	1.0	2.0