肝螺杆菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用研究

• 作者: 冯育芳 岳秉飞 贺争鸣 邢进 高正琴
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝螺杆菌 小沟结合物(MGB)探针 实时荧光定量PCR 检测
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫检测
• 页码范围: 833-838
• 分类号: R457.12
• 字数: 5754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2011.09.020

摘要

目的 建立特异、敏感、快速检测肝螺杆菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法.方法 针对肝螺杆菌flaB 基因的保守区设计特异性引物和探针,建立肝螺杆菌TaqMan MGB探针实时荧光定最PCR方检测方法,验证方法的特异性、敏感性和稳定性.对2008-2011年期间采集的1081份临床样本中的肝螺杆菌进行检测,同时进行分离培养和常规PCR检测.结果 建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法对肝螺杆菌的检测具有高度的特异性,对幽门螺杆菌、空肠弯曲菌、泰泽氏菌、侵肺巴斯德氏菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌均无交叉反应,检测的灵敏度达8.3拷贝.标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999,斜率为-3.227,TaqManMGB探针实时荧光定量PCR效率为100％.对1081份临床样本进行检测,TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR和常规PCR均能检出86份肝螺杆菌阳性样本,而细菌分离培养则仅检出4份阳性.结果显示,建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法比细菌分离培养方法更敏感,能够直接从临床样本中检出肝螺杆菌DNA,检测时间仅为2h.结论 研究建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有可靠、特异、敏感的特点,适用于肝螺杆菌的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳秉飞		117	385	11.0	14.0
2	贺争鸣		100	337	9.0	14.0
3	邢进		40	208	8.0	13.0
4	冯育芳		37	169	7.0	11.0
5	高正琴		23	103	5.0	9.0