结核分枝杆菌PE35基因真核表达载体的构建及其表达

• 作者: 朱琰 李仁德 杨丽萍 熊志红 程小星
• 来源期刊: 中国预防医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分枝杆菌 PE35 真核表达
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 995-997
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 获得带FLAG标签的结核分枝杆菌PE35的真核表达载体,并在293T细胞中检测其表达.方法 用PCR方法从质粒上获得PE35基因全长,克隆到pCDNA3-FLAG真核表达载体上；用脂质体介导的基因瞬时转染法,将构建正确的表达载体转染293T细胞；Western-blot法检测细胞中的FLAG融合蛋白的表达.结果 酶切鉴定和DNA序列分析显示构建了正确的FLAG-PE35真核表达载体,并能在真核细胞中表达相对分子量大小相符的重组蛋白.结论 成功构建了FLAG-PE35真核表达载体,并在真核细胞中得到表达.为研究PE35蛋白在结核分枝杆菌中的功能研究奠定了基础.