恶性疟原虫合子表面蛋白Pfs25毕赤酵母双启动子表达系统的构建及表达

• 作者: 刘晓 蒋琳 陆俭 陈勇 雷清
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 恶性疟原虫合子表面蛋白 毕赤酵母 双启动子 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1249-1253
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建恶性疟原虫合子表面蛋白Pfs25毕赤酵母双启动子表达系统并进行表达.方法 应用基因重组技术构建含pfs25基因的醇氧化酶启动子1(Alcohol oxidase promoter 1,AOX1)重组质粒pICpfs25和三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAP)重组质粒pGAPpfs25,取酶切鉴定和测序正确的重组质粒电转化毕赤酵母菌GS115,获得毕赤酵母重组体ICpfs25和GAPpfs25,并构建含两种启动子的酵母重组体IC-GAP/2pfs25,甲醇诱导pfs25基因表达,Western blot分析表达产物的反应原性,ELISA分析各重组体表达上清中Pfs25蛋白的含量.结果 各重组体的表达产物经SDS-PAGE分析均可见相对分子质量约25 000的Pfs25蛋白条带,双启动子重组体Pfs25蛋白的表达量约占表达上清的70％,明显高于单一启动子重组体,且双启动子重组体Pfs25蛋白的表达量随着补加甲醇量的增加而逐渐增加；各重组体的表达产物均可与小鼠抗Pfs25单抗487特异性结合；双启动子重组体表达上清的ELISA反应明显强于其他重组体表达上清.结论 已构建了恶性疟原虫合子表面蛋白Pfs25毕赤酵母双启动子表达系统,两种启动子共同作用可明显提高目的蛋白的表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆俭	兰州生物制品研究所第四研究室	16	116	6.0	10.0
2	蒋琳	兰州生物制品研究所第四研究室	37	103	6.0	7.0
3	雷清	兰州生物制品研究所第四研究室	16	54	5.0	6.0
4	陈勇	兰州生物制品研究所第四研究室	10	27	2.0	5.0
5	刘晓	兰州生物制品研究所第四研究室	9	32	3.0	5.0