BTBD10基因的原核表达和多克隆抗体制备

• 作者: 刘瑜 李春霖 胡仁明 谷昭艳 陈凤玲
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: BTBD10 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1263-1265
• 分类号: R349.6
• 字数: 2440字
• 语种: 中文
• DOI: 11-3275/R.20110629.1109.003

摘要

目的 克隆和表达BTBD10基因,为进一步研究BTBD 10与胰岛细胞增殖功能提供工具.方法 制备兔抗BTBD10多克隆抗体,利用PCR方法扩增BTBD10全长,经Bam H I和Sal I酶切后连接入pET32a原核表达载体,将重组表达质粒pET32a-BTBD 10转化大肠杆菌ROSSET,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯化,以纯化的BTBD10蛋白免疫新两兰大白兔,制备兔抗BTBD10的多克隆抗体,利用Western blot方法分析鉴定.结果 经双酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的BTBD10读码框.SDS-PAGE电泳分析显示IPTG诱导后表达约85kU的融合蛋白,与预期结果相符.将纯化的融合蛋白免疫家兔,获得兔抗BTBD10多克隆抗体血清,Western blot结果显示该抗体特异性好,效价高,目的条带位于56kU处.结论 成功构建人BTBD10原核表达载体,并获得了高纯度BTBD10重组蛋白及兔抗BTBD10多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘瑜	解放军总医院老年内分泌科	21	102	6.0	9.0
2	谷昭艳	解放军总医院老年内分泌科	16	62	5.0	7.0
3	胡仁明	复旦大学附属华山医院内分泌科	80	561	13.0	20.0
4	李春霖	解放军总医院老年内分泌科	178	1231	19.0	24.0
5	陈凤玲	复旦大学附属华山医院内分泌科	1	0	0.0	0.0