白念珠菌烯醇化酶1的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 侯天文 李玮 王宪灵 贺政新
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白念珠菌 原核表达 烯醇化酶 念珠菌病,侵袭性 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 35-39
• 页数: 5页
• 分类号: R379.4|R392-33
• 字数: 3716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2016.01.009

摘要

目的 构建白念珠菌烯醇化酶1(eno1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,制备其多克隆抗体. 方法聚合酶链反应(PCR)获取白念珠菌SC5314的eno1全长基因,克隆入原核表达载体pET30(a),转化感受态细胞E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后以亲和层析纯化重组蛋白并以SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western blot)法鉴定. 用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备Eno多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验( ELISA)测定抗体效价, Western blot法鉴定其特异性. 结果 成功构建原核表达质粒pET30(a)-eno1,诱导后表达的重组蛋白相对分子质量约为50 000,主要以可溶性上清形式存在. 纯化制备的eno1多克隆抗体效价约为1:12 800 000,可与重组Eno反应. 结论 成功获得白念珠菌eno1重组蛋白并制备了该蛋白的多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宪灵	解放军白求恩国际和平医院检验实验科	36	114	6.0	8.0
2	李玮	解放军白求恩国际和平医院检验实验科	21	106	5.0	9.0
3	贺政新	解放军白求恩国际和平医院检验实验科	23	81	5.0	7.0
4	侯天文	解放军白求恩国际和平医院检验实验科	23	92	5.0	8.0