NIRF蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 杨艳 段昌柱 金方敏 钱冠华
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: NIRF GST标签 原核细胞 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 56-60
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达NIRF基因,并纯化NIRF蛋白.方法 PCR扩增全长NIRF基因,克隆入原核表达质粒pGEX-4T-1中,转化E. coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并用GST 4B球珠亲和纯化目的 蛋白.结果 重组表达质粒pGST-NIRF经酶切鉴定证明构建正确.22℃条件下培养,菌体A600值达1.8时,加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG诱导7 h,能使GST-NIRF在上清中大量表达;纯化的重组GST-NIRF蛋白纯度达85%以上,可与GST抗体和NIRF抗体发生特异性结合.结论 已成功在大肠杆菌中表达了GST-NIRF蛋白,纯化的蛋白可用于NIRF的生物功能活性研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨艳	重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	14	107	5.0	10.0
2	段昌柱	重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	35	120	7.0	9.0
3	钱冠华	重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	8	24	3.0	4.0
4	金方敏	重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	1	4	1.0	1.0