分泌型mB7-H4-hlg重组融合蛋白定量检测方法的建立和应用

• 作者: 姜碧
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组融合蛋白 ELISA 免疫球蛋白恒定片段
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 分子、生化遗传学与PCR技术
• 页码范围: 26-28
• 页数: 3页
• 分类号: R394.3
• 语种: 中文

摘要

目的 建立双抗体夹心ELISA方法,定量检测重组小鼠共抑制分子B7-H4(mB7-H4)-人IgGα1 Fc段融合蛋白(mB7-H4-hlg)的分泌型表达.方法 将表达mB7-H4-hlg的真核表达栽体pmB7-H4-Fc转染COS-7细胞,并将该载体注入小鼠体内,制备重组mB7-H4-hlg融合蛋白,以羊抗人IgG为包被抗体,HRP标记的羊抗人lgG为检测抗体,通过配对实验、方阵滴定实验及绘制hlgG浓度与A450的标准曲线,建立定量检测重组mB7-H4-hlg融合蛋白双抗体夹心ELISA法.结果 建立了双抗体夹心ELISA方法,检测的线性范围为10-500ng/ml.标准曲线的回归方程为:y=0.0028x+0.0899,R2=0.9762,P＜0.05.应用该方法可快速检测体外和体内表达的重组mB7-H4-big融合蛋白的分泌量.结论 建立了一种可快速定量检测重组mB7-H4-hlg融合蛋白分泌表达的双抗体夹心ELISA法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜碧		10	24	3.0	4.0