人Delta-like4ext-26-217蛋白原核表达载体的构建及表达

• 作者: 伍艳兰 何飞 刘利 尹郸丹 张萍 李国辉 梁英民 韩骅 黄斯勇
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 生物学
• 关键词: Detla-like4 Notch信号途径 原核表达 血管发生
• 年，卷（期）: 2011,（22）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 5254-5257
• 分类号: Q513.1
• 字数: 3062字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-1815.2011.22.005

摘要

构建人Delta-like4ext-26-217原核表达载体并表达.采用PCR方法扩增hDll4ext-26-217多核苷酸序列,克隆入pMD18T载体.测序正确后,将其亚克隆入pET32a(+)原核表达载体,获得pET32a(+ )-hDll4ext-26-217载体.以该载体转化E.coli菌株BL21,IPTG诱导其表达.采用SDS-PAGE、Western Blot方法鉴定目的蛋白的表达.结果表明,采用SDS-PAGE,Western Blot等方法均可检测到目的蛋白TRX/hDll4ext-26-217,分子量约42.2 KD.主要以包涵体形式大量存在.以上结果为Detla-like4功能的进一步研究奠定了基础.