绿色荧光蛋白-CCNG2表达载体的构建及鉴定

• 作者: 任美思 刘洁 朱莉 李自娟 郭艳 钟鸣
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞周期蛋白G2 绿色荧光蛋白 基因载体
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-21
• 分类号: Q343
• 字数: 2587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.15.010

摘要

目的 为进一步探讨细胞周期蛋白G2(CCNG2)基因功能奠定基础.方法 以成人脑cDNA文库为模板,PCR扩增人CCNG2基因,In-Fusion技术定向克隆到pENTR1A中,酶切测序鉴定后重组到pcDNA6.2TM/EmGFP-DEST Gateway载体,构建pcDNA6.2-EmGFP-G2.将鉴定正确的质粒瞬时转染人舌鳞癌细胞Tca-8113,24 h后观察,定量PCR检测CCNG2 mRNA表达.结果 扩增得到1 032 bp的基因片段,经测序验证与GenBank中人CCNG2序列相符;pcDNA6.2-EmGFP-G2经酶切和测序鉴定无误.转染Tca-8113后,荧光信号除在胞质中表达外,在部分细胞的胞核DAPI染色弱信号区浓聚.转染该重组质粒后CCNG2 mRNA表达水平显著增高.结论 成功构建了以绿色荧光蛋白作为报告基因的CCNG2表达载体,为进一步研究CCNG2基因功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱莉	中国医科大学口腔医学院	18	63	5.0	7.0
2	刘洁	中国医科大学实验技术中心	117	656	12.0	19.0
3	钟鸣	中国医科大学口腔医学院	102	465	11.0	15.0
4	郭艳	中国医科大学口腔医学院	59	189	7.0	7.0
5	李自娟	中国医科大学口腔医学院	6	30	3.0	5.0
6	任美思	中国医科大学口腔医学院	9	11	2.0	3.0