泛素结合酶UFCl基因的荧光表达载体构建

• 作者: 吴小玲 廖艳阳 彭东海 贺爱兰
• 来源期刊: 现代农业科技
• 学科: 物理学
• 关键词: UFC1基因 克隆 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 农业生物
• 页码范围: 23-24,28
• 分类号: O78
• 字数: 1708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5739.2011.08.009

摘要

利用pEGFP-C3作为载体,构建与绿色荧光蛋白基因相连的泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)序列的真核表达质粒,观察其在真核细胞中的表达和定位,为进一步研究UFC1基因功能打下了基础.采用RT-PCR方法从宫颈癌Hela细胞中扩增UFC1基因全长cDNA,双酶切后克隆到真核表达载体pEGFP-C3中,构建并鉴定pEGFP-C3-UFC1质粒.经脂质体介导转染Hela细胞后,在荧光显微镜下观察目的蛋白在真核细胞内的表达情况.双酶切鉴定和测序分析均证实,已成功构建pEGFP-C3-UFC1重组载体.重组载体转染Hela细胞,观察到绿色荧光蛋白表达,还可见绿色荧光呈点状分布于细胞质中;而对照pEGFP-C3质粒转染Hela细胞,绿色荧光蛋白则呈弥散状分布.成功克隆了UFC1基因,构建了pEGFP-C3-UFC1重组质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺爱兰		14	28	3.0	4.0
2	吴小玲		21	205	9.0	14.0
3	彭东海		19	46	3.0	6.0
4	廖艳阳		10	60	4.0	7.0