hTEFT重组绿色荧光表达载体的构建与表达

• 作者: 曹明瑞 李一冬 赵国新
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hTERT 绿色荧光表达载体 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 171-173
• 页数: 3页
• 分类号: R730.5
• 字数: 1616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.02.012

摘要

目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒.方法 用RT-PCR方法从肝癌组织中提取总RNA扩增出hTERT基因片段,将其连接pGEM-TEasy质粒上,将重组质粒pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体同时用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,再将重组的pEGFP-C3-hTERT基因片段转染NIH3T3细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞系,荧光倒置显微镜观察并检测转染细胞的hTERT mRNA表达水平.结果 DNA序列分析证实了重组载体pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3-hTERT内插入片段的碱基组成与公开发表的hTERT序列一致.转染pEGFP-C3-hTERT的NIH3T3细胞可见绿色荧光,并检出高水平表达的hTERT.结论 成功构建高效表达hTERT的真核表达载体,为以hTERT为靶点的肿瘤治疗打下实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一冬	郑州大学第一临床医学院妇产科	8	14	3.0	3.0
2	赵国新	河南省医学科学研究所免疫室	20	127	6.0	11.0
3	曹明瑞	郑州大学第一临床医学院妇产科	7	14	2.0	3.0