低温脂肪酶产生菌Trichosporon pullulans的脂肪酶基因克隆

• 作者: 肖冬
• 来源期刊: 化学与生物工程
• 学科: 生物学
• 关键词: 酵母 脂肪酶基因 克隆 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 71-76
• 分类号: Q78
• 字数: 4971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5425.2012.06.021

摘要

以产低温脂肪酶菌株5-1为材料,用酶法和CTAB法分别提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测亮带进行比较,结果表明用CTAB法提取的DNA的完整性更好、浓度更高；该菌株通过18S rDNA基因鉴定,即以待检菌株提取的DNA为模板,以18SF、18SR为引物,进行PCR扩增,由18S rRNA的保守序列分析,鉴定为Trichosporon pullulans茁芽丝孢酵母属；利用脂肪酶的同源基因片段来设计引物,以该菌株的DNA为模板,进行PCR筛选,克隆脂肪酶基因;并对模板量、退火温度两个重要因素进行优化,初步确定最佳PCR扩增条件为:模板量为DNA原液,退火温度为55～45℃梯度降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖冬		1	1	1.0	1.0