TDG变体的构建、表达、纯化及其DNA修复功能研究

• 作者: 华子春 林小伟
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胸腺嘧啶糖苷酶 G:U错配 表达 纯化 活性测定
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 389-392
• 分类号: Q786|Q754
• 字数: 2903字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2012.04.001

摘要

目的:研究DNA错配修复蛋白 mTDG截短变体修复G:U错配的生物活性.方法:通过PCR扩增得到mTDG的C-端截短变体mTDG(1-279)基因片段,用Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切并回收,然后插入双酶切过的原核表达载体pET28a(+),得到pET28a-mTDG(1-279)重组质粒.将重组质粒转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导表达,过Ni+柱纯化得到His- mTDG(1-279)融合蛋白.最后通过TDG体外测活试验,测试mTDG(1-279)蛋白对G:U错配的修复活性.结果:mTDG(1-279)蛋白获得了表达和分离纯化,且体外测活实验表明mTDG(1-279)蛋白具有良好的G:U错配修复活性.结论:mTDG(1-279)蛋白依然具有修复G:U错配的生物活性,为进一步研究其活性结构域等结构与功能关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华子春	南京大学医药生物技术国家重点实验室	125	473	11.0	17.0
2	林小伟	南京大学医药生物技术国家重点实验室	1	1	1.0	1.0