幽门螺杆菌GroEL蛋白重组表达及表达产物小鼠免疫保护作用

• 作者: 严杰 孙爱华 孙萍萍 张慧 王欢 王艳芳
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 GroEL蛋白 重组表达 免疫保护作用
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 340-345
• 分类号: R392
• 字数: 4728字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2012.04.014

摘要

目的 检测幽门螺杆菌临床菌株groEL基因序列差异,确定重组表达的GroEL蛋白(r-GroEL)抗原性、免疫反应性以及对幽门螺杆菌感染小鼠的免疫保护性.方法 采用PCR及测序法了解幽门螺杆菌临床菌株groEL基因序列.构建幽门螺杆菌groEL基因pET42a-E.coli BL21DE3原核表达系统,采用SDS-PAGE及凝胶图像分析系统确定rGroEL表达量,Ni-NTA亲和层析法提纯rGroEL.采用ELISA和Western blot检测rGroEL的抗原性和免疫反应性,采用幽门螺杆菌全菌为包被抗原的ELISA确定GroEL膜定位.采用幽门螺杆菌小鼠感染模型了解rGroEL免疫保护作用.结果 35株幽门螺杆菌临床菌株groEL基因序列相似性高达99.4％～ 100％.rGroEL表达量可达细菌总蛋白的56％,SDS-PAGE后提纯的rGroEL在凝胶中显示为单一的条带.rGroEL可诱导家兔和小鼠产生高效价IgG抗体,同时也能被幽门螺杆菌全菌抗体(Hp-IgG)或rGroEL-IgG识别并与之结合.GroEL是幽门螺杆菌表面蛋白抗原.50、100或200 μg rGroEL免疫可分别使50.0％ (6/12)、75.0％ (9/12)和91.7％ (11/12)小鼠免于幽门 螺杆菌SS1株的感染,200 μg rGroEL免疫保护率(91.7％)显著高于50μg rGroEL(50.0％)( P＜0.05).结论 幽门螺杆菌GroEL蛋白是序列保守、具有良好免疫原性和免疫保护性的表面抗原,可作为基因工程疫苗候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王欢	浙江大学医学院病原生物学系	35	178	7.0	11.0
2	孙爱华	浙江医学高等专科学校基础医学部	112	523	11.0	15.0
3	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
4	王艳芳	杭州师范大学基础医学部	14	47	4.0	6.0
5	张慧	浙江树人大学生物工程学院	22	272	6.0	16.0
6	孙萍萍	浙江大学医学院病原生物学系	2	10	2.0	2.0