结核分枝杆菌Rv3671c基因的克隆表达及免疫印迹检测

• 作者: 何琳静 刘君 刘忠华 崔振玲 蒯守刚 裴豪 麦广良 黄利华
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 结核 Rv3671c蛋白 抗原 细菌蛋白质类
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 906-908
• 页数: 3页
• 分类号: R378.91+1|Q781
• 字数: 2640字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建结核分枝杆菌Rv3671c蛋白的重组质粒,在大肠埃希菌中表达并纯化重组蛋白Rv3671c,并评价结核分枝杆菌Rv3671c结构域多肽的免疫学特性.方法 将编码结核分枝杆菌Rv3671c蛋白的基因克隆到pET-28a载体,并在大肠埃希菌中表达,镍亲和层析和离子层析法纯化重组Rv3671c蛋白,透析复性和Lowry法测定蛋白质浓度.对蛋白质悬液进行SDS-PAGE分析并进行免疫印迹检测.结果 结核分枝杆菌Rv3671c蛋白在大肠埃希菌中成功表达,层析纯化获得纯度为95.0％的重组Rv3671c蛋白,免疫印迹检测显示重组表达蛋白与结核病患者混合血清具有良好亲和性.结论 Rv3671c结构域多肽可作为新的结核病血清学检测方法的候选抗原肽组分.