猪microRNA-378-1过表达载体构建及细胞水平验证

• 作者: 敖红 李奎 李莹 白立景 鞠辉明
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: microRNA-378-1 microRNA 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究资源
• 页码范围: 942-947
• 分类号: S572
• 字数: 3149字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.08.014

摘要

microRNA对细胞的增殖和分化有着重要的调节作用,从大白猪(Sus scrofa)基因组DNA上扩增microRNA-378-1前体序列,经Xho Ⅰ酶切后回收相应片段,连接到pEGP-miR载体中,构建重组载体pEGP-miR-378-1,转染猪胎儿成纤维细胞系(PEF),通过荧光观察转染效率及报告基因的表达效率,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)测定细胞内microRNA-378-1的表达活性.结果表明,成功地构建了重组载体pEGP-miR-378-1;荧光观察转染后的细胞,显示有较高的转染效率,报告基因有较高的表达效率；QRT-PCR结果显示,实验组和对照组microRNA-378-1表达显著提高,实验组和对照组细胞间差异极显著(P＜0.01)；为制备转基因动物研究microRNA-378-1功能提供技术平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李奎	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	73	382	11.0	16.0
2	敖红	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	25	160	7.0	12.0
3	李莹	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	15	95	6.0	9.0
4	鞠辉明	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	5	10	2.0	3.0
5	白立景	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	9	16	2.0	3.0