稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定

• 作者: 吴喜林 吴稚伟 程林 袁钟平
• 来源期刊: 南京大学学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: CC型趋化因子受体5 稳定转染 细胞酶联免疫吸附实验 人类免疫缺陷病毒
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 804-808
• 分类号: Q959.848
• 语种: 中文

摘要

CC型趋化因子受体5（CCR5）是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一．将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3．1CCR5稳定转染CHOK1细胞，G418筛选2周后，在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆，最后得到22个细胞克隆，用流式细胞术检测细胞表面CCR5蛋白，发现克隆10能够高表达人CCR5基因．使用RT—PCR鉴定克隆10CCR5基因转录情况，结果在预期的位置检测出目的条带．采用细胞ELISA的方法进一步鉴定克隆10细胞表面CCR5的表达，结果该克隆的405nm光密度值是对照组的13．6倍．结果表明，本研究建立的稳定转染人CCR5的CHO细胞系能够高效表达CCR5基因，为研究HIV—1共受体、筛选病毒中和抗体、以及抗病毒药物奠定了基础．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴稚伟	南京大学医学院公共健康医学中心	12	25	3.0	3.0
2	吴喜林	南京大学医学院公共健康医学中心	4	14	3.0	3.0
3	程林	南京大学医学院公共健康医学中心	3	10	2.0	3.0
4	袁钟平	南京大学医学院公共健康医学中心	2	2	1.0	1.0