猪细小病毒NS1抗原表位的真核表达及ELISA方法的建立

• 作者: 赵绪永 边传周 马辉
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 NS1基因 真核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 628-632
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65|Q78
• 语种: 中文

摘要

以猪细小病毒NS1抗原表位的真核表达及ELISA建立为目的,以猪细小病毒基因组DNA为模板,扩增获得PPV NS1主要抗原表位基因,将其插入到真核表达载体pPICZα-A中,获得重组质粒pPICZα-A-NS1.电转化后将重组毕赤酵母菌株诱导表达,SDS-PAGE检测证实重组蛋白获得了高效表达,Western blot实验表明表达产物具有良好的反应原性.将纯化后的重组蛋白包被酶标板,经棋盘法优化,初步建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法.结果表明,抗原最佳包被浓度为1.9 μg/mL,血清最佳稀释度为1:80,阳性判断标准定为OD待检血清＞0.4且OD待检血清/OD标准阴性值＞2.0.用该方法对猪血清样品进行检测,结果显示本方法与HI试验的符合率达91.2％,与国外同类试剂盒的符合率为92.1％,该间接ELISA方法特异性强、敏感性高,可用于猪细小病毒病感染抗体的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵绪永		25	132	6.0	10.0
2	边传周		99	551	13.0	19.0
3	马辉		23	70	5.0	7.0