重组双基因表达质粒pIRES-NGF-VEGF165转染大鼠BMSCs及表达鉴定

• 作者: 娄季宇 白宏英 范波胜
• 来源期刊: 中风与神经疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经生长因子 血管内皮生长因子165 骨髓间充质干细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 论著与经验总结
• 页码范围: 1077-1079
• 页数: 3页
• 分类号: R741.02
• 字数: 3552字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用脂质体转染技术,将带有神经生长因子(NGF)基因和血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的重组双基因表达质粒pIRES-NGF-VEGF165转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),获得能稳定表达NGF和VEGF165的转基因BMSCs.方法 采集和培养大鼠BMSCs；利用脂质体转染技术,将pIRES-NGF-VEGF165质粒转染大鼠BMSCs,经G418筛选,获得阳性细胞克隆,进行扩增培养；应用RT-PCR和Western blot检测NGF、VEGF165的表达,并分别利用PC12细胞生长实验和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管形成实验进行NGF和VEGF165的活性检测.结果 质粒pIRES-NGF-VEGF165成功转染入BMSCs,可正确表达NGF和VEGF165,并具有生物学活性.结论 获得了能够稳定表达NGF和VEGF165的大鼠BMSCs,为进一步研究NGF及VEGF165双基因治疗脑梗死奠定了重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	娄季宇	郑州大学第二附属医院神经内科	139	810	13.0	19.0
2	白宏英	郑州大学第二附属医院神经内科	134	597	11.0	16.0
3	范波胜	焦作煤业集团中央医院神经内科	25	58	5.0	6.0