目的基因慢病毒载体的构建与包装

• 作者: 侯小霞 王孟丽 马建党
• 来源期刊: 中华实用诊断与治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 构建 目的基因 包装
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 766-767,770
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨Oct4,Sox2,c-Myc及Klf4-慢病毒载体的构建与包装.方法 从含有Oct4,Sox2,c-Myc及Klf4的质粒中获取目的基因,将目的基因与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,其连接产物转化细菌感受态细胞,对长出的阳性克隆进行测序和比对分析,并对长出的阳性克隆进行PCR鉴定,通过三质粒系统共转染293T细胞对慢病毒进行包装并进行滴度测定.结果 成功构建并包装出Oct4,Sox2,c-Myc及Klf4-慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致；PCR鉴定结果显示,4个目的基因均为阳性；Oct4,Sox2,c-Myc及Klf4-慢病毒载体滴度分别为1×109,1×109,1×109,2×109TU/mL.结论 通过三质粒系统可构建并包装Oct4,Sox2,c-Myc及KIf4-慢病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王孟丽	洛阳市中心医院检验科	3	9	1.0	3.0
2	马建党	洛阳市中心医院检验科	8	20	3.0	4.0
3	侯小霞	洛阳市中心医院检验科	3	2	1.0	1.0