口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定

• 作者: 卢清侠 张改平 李清州 王世红 郝慧芳 金前跃
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫 3D聚合酶 T细胞表位重组蛋白 原核表达 疫苗佐剂
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 133-137
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3562字
• 语种: 中文

摘要

为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV) 3D蛋白N端T细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET- 28a中,构建原核表达质粒pET28a - 115,并将重组质粒转化至BL21 (DE3)细胞.经IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western - bolt鉴定,结果显示,在16 kD处有一条明显的蛋白表达条带.对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50％为可溶性蛋白,经Ni- NTA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白.研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础.