hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒的构建及其在A549肺癌细胞中的表达

• 作者: 林贯川
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 人GPR177蛋白 hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒 A549肺癌细胞 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 477-481
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2012.05.001

摘要

目的 构建hGPR 177/PCDNA3.1(+)重组质粒,并在A549肺癌细胞中表达hGPR177蛋白.方法 利用生物分析软件DNAMAN 6.0选取合适的穿梭载体PCDNA3.1(+)和酶切位点.用质粒提取试剂盒对穿梭载体PCDNA3.1(+)及含有hGPR177基因pReceive-B04质粒进行抽提,并对其进行双酶切.使用DNA连接酶把hGPR177基因与PCDNA3.1(+)酶切片段连接,重新构建hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒.将重组质粒通过电转的方式转导进A549肺癌细胞.运用细胞培养技术,培养已电转hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒的A549肺癌细胞.结果 利用0.8％琼脂糖凝胶电泳检测hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒的质量为6 999 bp.经过机械破碎后获取细胞提取物,电泳鉴定出现GPR177蛋白带.结论 成功构建了hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒,并在A549肺癌细胞表达系统中表达出人GPR177蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林贯川	澳大利亚国立大学医药生物环境学院	1	0	0.0	0.0