Hsa-microRNA-138慢病毒表达载体的构建与鉴定

• 作者: 吴渊 孙诚谊 江建新 高珊
• 来源期刊: 贵阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA,小干扰 慢病毒属 载体 波形蛋白 胰腺肿瘤
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 469-472,475
• 页数: 5页
• 分类号: R373-33
• 字数: 2980字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建hsa-microRNA-138慢病毒表达载体.方法:PCR扩增pri-miR-138-2前体序列,克隆至plenti-GFP慢病毒表达载体,双酶切及测序鉴定正确后进行慢病毒包装与滴度检测 ;构建成功后感染人胰腺癌细胞PANC-1,48 h后Real-time Q-PCR检测miR-138的表达.结果:酶切、测序鉴定证明插入序列正确,测定病毒滴度为1×109TU/ml,病毒感染48 h后的PANC-1胰腺癌细胞观察可见绿色荧光,Real-time Q-PCR显示被感染细胞的miR-138表达量较未感染细胞显著增高.结论:建立了高效稳定表达hsa-miR-138的慢病毒转染系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙诚谊	贵阳医学院附院肝胆外科	160	655	10.0	19.0
2	江建新	贵阳医学院附院肝胆外科	32	94	6.0	8.0
3	吴渊	贵阳医学院附院肝胆外科	1	2	1.0	1.0
4	高珊	贵阳医学院附院消化内科	3	4	2.0	2.0