串联表达载体中短重复序列（BmKb1）n模板的PCR效率及其优化条件研究

• 作者: 余腾 刘燕群 李正 罗锋 范丽梅
• 来源期刊: 江汉大学学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: 重复序列 PCR BmKb1 循环数
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 2491字
• 语种: 中文

摘要

采用Overlap PCR法获取BmKb1基因,构建载体pGEX-6p-1/BmKb1,同尾酶技术用于构建串联表达载体pGEX-6p-1/（BmKb1）n（n=2,4,6,8,10）。以pGEX-6p-1/（BmKb1）n为模板,使用标准PCR程序研究短重复序列PCR效率;以BmKb1八倍体为模板,分别研究PCR循环数、引物终浓度及退火温度对短重复序列PCR效率及特异性的影响。结果表明：串联重复序列数目增加,则非特异性条带增加,特异性条带含量减少;BmKb1基因串联体PCR扩增在18～20循环数、引物终浓度为0.05～0.1μM、60～62℃较高退火温度时,可获得相对高产量高特异性BmKb1基因串联体PCR片段。本研究将为串联表达载体克隆、筛选、测序及基因组STRs序列克隆测序提供技术参考。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘燕群	江汉大学医学院	31	96	6.0	8.0
2	李正	江汉大学医学院	11	14	3.0	3.0
3	余腾	江汉大学医学院	7	17	3.0	4.0
4	范丽梅	江汉大学医学院	5	27	3.0	5.0
5	罗锋	江汉大学医学院	6	17	3.0	4.0