HRM筛查PROC基因突变方法的建立和应用

• 作者: 傅启华 应春妹 张岚 张纪蔚 沈薇 顾怡
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 高分辨率熔解曲线 蛋白C 缺陷 基因
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22
• 分类号: Q503
• 字数: 2451字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2012.03.006

摘要

目的 利用高分辨率熔解曲线(HRM)结合PCR技术,建立遗传性蛋白C缺陷症患者的蛋白C基基因(PROC)突变筛查方法.方法 收集仁济医院2010年4月～2011年6月收治的9例蛋白C缺陷的静脉血栓患者(经测序PROC基因均已知)及其6例确认有PROC基因缺陷的患者家属DNA标本,通过设计HRM引物,用已知PROC突变的DNA标本进行构建,建立PROC基因外显子1,2,3,7,8突变HRM筛查方法.同时对3例疑似PROC基因缺陷患者,进行该方法的验证.结果 PROC基因外显子1,2,7,8区,突变体与野生型通过HRM图形可进行区分.对3例疑似PROC基因缺陷标本,HRM均筛查出突变,经测序2例为相同外显子7区杂合突变c.565C＞T,合并外显子2区杂合同义突变c.66T＞C,另1例为外显子7区杂合缺失c.577～579del,合并外显子1区多态性位点rs1799810 A＞T.综合统计15例已知标本和3例验证标本,HRM对于PROC基因外显子1,2,7,8区准确度分别为100％,94.4％,100％和91.7％.外显子3区由于缺乏突变病例,无法构建,改为直接测序法.结论 该研究建立了HRM结合直接测序法筛查PROC基因变异的方法.该方法能较快速、方便、经济地筛查PROC变异,适用于遗传性PC缺陷症基因诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	应春妹	上海交通大学医学院附属仁济医院检验科	68	616	14.0	21.0
2	张纪蔚	上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科	66	498	12.0	19.0
3	傅启华	上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科	66	367	10.0	15.0
4	沈薇	上海交通大学医学院附属仁济医院检验科	24	47	5.0	6.0
5	顾怡	上海交通大学医学院附属仁济医院检验科	13	51	5.0	7.0
6	张岚	上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科	50	121	6.0	8.0