结核分枝杆菌Ag85A/MPT-64融合基因DNA疫苗的构建及免疫研究中ELISPOT技术的应用

• 作者: 于庭 包洪 张娟 张红 蒋俊 马龙凤
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Ag85A MPT-64 DNA疫苗 ELISPOT
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 20-23
• 分类号: R186+.2
• 字数: 3646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2012.01.007

摘要

目的 构建结核分枝杆菌蛋白Ag85A/MPT-64融合基因为基础的DNA疫苗,并利用ELISPOT技术检测其免疫原性.方法 利用PCR和基因克隆技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85A/MPT-64编码基因,构建真核表达载体,用酶切和双向DNA测序进行鉴定.鉴定正确的阳性克隆重组质粒,肌注免疫小鼠,3周后用ELISPOT法检测抗体滴度.结果 构建到真核载体中的结核分枝杆菌H37Rv株Ag85A/MPT-64融合基因经序列测定证实无突变.ELISPOT法检测几何平均滴度为1∶1 000.结论 以Ag85A/MPT-64融合基因为基础的DNA疫苗的成功构建和表达以及ELISPOT技术的应用,为进一步研究其在结核病与肿瘤防治方面的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于庭		61	297	9.0	14.0
2	张娟		13	71	5.0	8.0
3	包洪		22	97	5.0	9.0
4	张红		11	31	4.0	5.0
5	蒋俊		3	10	2.0	3.0
6	马龙凤		2	7	2.0	2.0